0.2ng / G Ppb حساسية Kanamycin ELISA عدة أدوية عالية الدقة

بروتوكول اختبار ELISA

قم بتسمية الشرائط الفردية التي سيتم استخدامها وكواشف الكواشف على النحو التالي:

• أضف 50 ميكروليتر من كل معايير كاناميسين في نسختين إلى آبار مختلفة (أضف المعايير إلى اللوحة فقط بالترتيب من التركيز المنخفض إلى التركيز العالي).
• إضافة 50 ماي من كل عينة في نسختين إلى آبار عينة مختلفة.
• أضف 50 ميكرولتر من أب # 2 المترافق مع HRP لكل بئر و 50 ميكرو لتر من جسم كاناميسين المضاد رقم 1 لكل بئر.تخلط جيدا عن طريق هز اللوح يدويا برفق لمدة 30 ثانية.
• احتضان الطبق لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية / 68-77 درجة فهرنهايت).(تجنب أشعة الشمس المباشرة وأغطية مقاعد البدلاء الباردة أثناء فترة الحضانة.يوصى بتغطية لوحة microtiter أثناء الحضانة).
• اغسل اللوحة 4 مرات بـ 250 ميكرو لتر من محلول غسيل 1X.بعد الغسل الأخير ، اقلب اللوحة واضغط برفق على اللوحة لتجف على المناشف الورقية (نفذ الخطوة التالية فورًا بعد غسل اللوحة. لا تدع اللوح يجف في الهواء بين خطوات العمل).
• أضف 100 ميكرولتر من ركيزة TMB.توقيت رد الفعل مباشرة بعد إضافة الركيزة.امزج المحلول عن طريق هز اللوحة يدويًا برفق لمدة 30 ثانية أثناء الحضانة (لا تعيد أي ركيزة إلى الحاوية الأصلية لتجنب أي تلوث محتمل.أي محلول ركيزة يظهر عليه اللون يدل على التدهور ويجب التخلص منه.يوصى بتغطية لوحة microtiter أثناء الحضانة).
• بعد الحضانة لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (20 - 25°ج / 68 - 77°F) ، أضف 100 ميكروليتر من Stop Buffer لإيقاف تفاعل الإنزيم.
• اقرأ اللوحة في أسرع وقت ممكن بعد إضافة Stop Buffer على قارئ لوحة بطول موجة 450 نانومتر (قبل القراءة ، استخدم ممسحة خالية من النسالة في أسفل اللوحة لضمان عدم تداخل الرطوبة أو بصمات الأصابع مع القراءات).