|
| الـ MOQ: | 5 مجموعات |
| السعر: | قابل للتفاوض |
| العبوة القياسية: | لون التعبئة |
| فترة التسليم: | 5-7 أيام |
| طريقة الدفع: | T/T |
| القدرة على التوريد: | 100 طقم شهريا |
ريجينTMمجموعة اختبار ELISA للكاناميسين هي اختبار المناعة الإنزيمية التنافسية لتحليل الكمية للكاناميسين في اللحوم / الكبد / الكلى ، الليزات الخلوية ، البول ، المصل والحليب.
أساليب استخراج عالية الاسترداد (> 80٪) وسريعة (10-40 دقيقة) وفعالة من حيث التكلفة.
حد الكشف هو 0.2 نانغ/غ.
قابلية إعادة إنتاج عالية
اختبار ELISA سريع (أقل من ساعة واحدة بغض النظر عن عدد العينات).
تستند هذه الطريقة إلى اختبار ELISA اللونية التنافسية. تم تغطية كاناميسين- BSA في آبار الصفائح. خلال التحليل، يتم تحديد نوع الكاناميسين- BSA.يتم إضافة العينة والجسم المضاد للكاناميسين (الجسم المضاد # 1) والجسم المضاد المرتبط بـ HRP (الجسم المضاد المرتبط بـ HRP # 2) إلى الآبار للفحصإذا كانت بقايا الكاناميسين موجودة في العينة، فإنها سوف تتنافس مع الكاناميسين على آبار الصفيحة للكاناميسين الأجسام المضادة،يستهدف الأجسام المضادة الرئيسية التي هي معقدة للدواء المغطاة على آبار الصفيحةإن شدة اللون الناتجة ، بعد إضافة رصيف HRP (TMB) ، لها علاقة عكسية مع تركيز بقايا كاناميسين في العينة.
ريجينTMمجموعة اختبار الكاناميسين ELISA لديها القدرة على تحديد 96 أو اختبار 42 عينة في نسخة مزدوجة (بافتراض 12 بئر للمعايير).أعد أي حفرة مجهرية غير مستخدمة إلى كيس الورق المقوى وإغلقها مرة أخرى بالمجفف المقدم في العبوة الأصلية* تخزين المجموعة عند 2- 8 درجات مئوية * مدة صلاحية المجموعة هي 12 شهراً عندما يتم تخزين المجموعة بشكل صحيح.
| محتويات الحزمة | المبلغ | التخزين |
| صفيحة مغلفة بالكاناميسين | 1 × 96 حفرة صفيحة | 2-8 درجة مئوية |
|
معايير الكاناميسين التحكم السلبي (أنبوب CAP أبيض) 0.2 ng/mL (أنبوب CAP الأصفر) 0.6 ng/mL (أنبوب CAP البرتقالي) 1.8 ng/mL (أنبوب الغطاء الوردي) 5.4 ng/mL ((أنبوب الغطاء الأرجواني 16.2 نانغ/ميلتر (أنبوب غطاء أزرق) 1000 نانغ/ميلتر ((تعزيز، اختياري، أنبوب القفص الأحمر) |
1 مل 1 مل 1 مل 1 مل 1 مل 1 مل 1 مل |
2-8 درجة مئوية
|
| كاناميسين Ab#1 | 6.0 مل | 2-8 درجة مئوية |
| Ab#2 المرتبطة بـ HRP | 6.0 مل | |
| 10×مواد تخفيف العينة | 15 مل | |
| 20 × محلول الغسيل | 28 مل | |
| أوقف المكافئ | 12 مل | |
| TMB Substrate (الجزء الرئيسي) | 12 مل | |
| 10 × عينة إضافية عازلة (اختياري) | 15 مل | |
| عينة عازلة رصيد | 2 مل |
إذا كنت لا تخطط لاستخدام المجموعة لأكثر من شهر واحد، احتفظ بـ Kanamycin Standard Stock، و Kanamycin Antibody #1 و HRP- Conjugated Antibody #2 في درجة حرارة -20 درجة مئوية أو في الثلاجة.
| نوع العينة | حد الكشف(ng/g أو ppb) |
| الأسماك/الروبيانات/اللحوم/الكبد/الكلى | 8 |
| الليزات الخلوية | 2 |
| البول / المصل | 5 |
| الحليب | 2 |
| المحللات | التفاعل المتقاطع (%) |
| الكاناميسين | 100 |
| ستريبتوميسين | < 0.1 |
| ديهيدروستريبوتوميسين | < 0.1 |
| نيوميسين | < 0.1 |
قارئ لوحات (microtiter) (450 نانومتر)
خلاط الأنسجة (على سبيل المثال المثالي للأنسجة)
خلاط الدوران (مثل خلاط الدوران الجيني من VWR)
10أنابيب 20، 100 و 1000 لتر
أنبوب متعدد القنوات: 50 - 300 لتر (اختياري)
تأكد من تخزين العينات بشكل صحيح. بشكل عام، يجب تجميد العينات عند 2-4 درجة مئوية لمدة لا تزيد عن 1-2 أيام. تجميد العينات إلى -20 درجة مئوية على الأقل إذا كانت بحاجة إلى تخزينها لفترة أطول.يمكن إذابة العينات المجمدة في درجة حرارة الغرفة (20 25 ° C / 68 77 ° F) أو في الثلاجة قبل الاستخدام.
خذ 100 لتر من الليزات الخلوية، وأضف 900 لتر من 1 × العينة المخفف العازل، خلط جيدا.
الطرد المركزي لمدة 5 دقائق عند 4000 g
خذ 50 ليرة واحدة من المادة فوق المستوى لكل بئر للاختبار.
ملاحظة: عامل التخفيف: 10
إلى 1.0 غرام من العينة المتجانسة، إضافة 4.0 مل من 1 × العينة Ext.
قم بتدوير العينة لمدة دقيقة مع خلاط الدوران.
قم بتفريغ العينة لمدة 5 دقائق عند 4000 غرام.
نقل بعناية 200uL من الطبقة العليا إلى أنبوب جديد,إضافة 1.375mL من 1X مخفف العينة و 25uL من عينة الموازنة العازل ، الدوران لمدة 30 ثانية.
استخدم 50 لتر لكل بئر للفحص.
ملاحظة: عامل التخفيف: 40
خذ 50 يو ليتر من عينة البول أو المصل، وأضف 1.2 مل من مخفف 1X العينة، ومزج جيدا.
طرد المركزي لمدة 5 دقائق عند 4000 غرام
خذ 50 لتر من السوبرنيتانت لكل بئر للاختبار.
ملاحظة: عامل التخفيف: 25
ملاحظة: عامل التخفيف:10
مهم: يجب أن يتم رفع جميع المفاعلات إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام (1 2 ساعات في20 25°C / 68 ¢ 77°تأكد من قراءة قسم " التحذيرات والاحتياطات "الصفحة3.يجب تحضير محلولات قبل اختبار ELISA مباشرة. يجب خلط جميع المفاعلات عن طريق عكسها أو الدوران بلطف قبل الاستخدام. يجب تحضير أحجام مطلوبة لعدد الآبار التي يتم تشغيلها.لا تعيد المفاعلات إلى أنابيب أو زجاجات المخزون الأصليةيمكن استخدام خزانات إستخدام مرة واحدة عند التعامل مع المفاعلات لتقليل خطر التلوث ويوصى به.
خلط حجم واحد من محلول غسل 20X مع 19 حجم من الماء المقطر.
تسمية الشرائط الفردية التي سيتم استخدامها والفاعلات المشاركة على النحو التالي:
| مكون | الحجم لكل تفاعل | 24 ردود الفعل |
| الأجسام المضادة للكاناميسين #1 | 50 لتر | 1. 2 مل |
| HRP-Conjugated Ab #2 | 50 لتر | 1. 2 مل |
| 1X محلول الغسيل | 1.0 مل | 24 مل |
| أوقف المكافئ | 100 ليرة | 2.4 مل |
| TMB Substrate (الجزء الرئيسي) | 100 ليرة | 2.4 مل |
إضافة 50 ليرة واحدة من كل معيار كاناميسين في نسختين في آبار مختلفة (إضافة المعايير إلى لوحة فقط في الترتيب من تركيز منخفض إلى تركيز مرتفع).
إضافة 50 لتر من كل عينة في نسخة مزدوجة إلى آبار عينة مختلفة.
إضافة 50 لتر من HRP-Conjugated Ab # 2 إلى كل بئر و 50 لتر من Kanamycin Antibody # 1 إلى كل بئر. خلط جيدًا عن طريق هز الصحن بلطف يدويًا لمدة 30 دقيقة.
قم بحفر الصفيحة لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (20 25 °C / 68 77 °F).تجنب الأشعة الشمسية المباشرة وأعلى المقاعد الباردة أثناء الحضانة. يوصى بتغطية لوحة الميكروتيتير أثناء الحضانة).
اغسل اللوحة 4 مرات بـ 250 ليرة واحدة من محلول الغسيل. بعد الغسل الأخير، قم بعكس اللوحة وانقر بلوحة جافة على مناشف ورقية برفق (أداء الخطوة التالية مباشرة بعد غسل الأطباق.لا تدع الصفيحة لتجف في الهواء بين خطوات العمل).
إضافة 100 لتر من الركيزة TMB. وقت التفاعل مباشرة بعد إضافة الركيزة. خلط المحلول عن طريق هز اللوحة برفق لمدة 30s أثناء الحضانة (((لا تعيد أي من الأساسيات إلى الحاوية الأصلية لتجنب أي تلوث محتمل. أي محلول أساسي يظهر تلوينًا يشير إلى التدهور ويجب التخلص منه.يوصى بتغطية لوحة الميكروتيتير أثناء الحضانة).
بعد الحضانة لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (20 25°C / 68 ¢ 77°Fإضافة 100 ليرة واحدة من بوفر التوقف لإيقاف تفاعل الإنزيم.
قراءة اللوحة في أقرب وقت ممكن بعد إضافة Stop Buffer على قارئ اللوحة مع طول موجة 450 نانومتر (قبل القراءة ،استخدم مسحات خالية من القشرة على قاع اللوحة لضمان عدم وجود رطوبة أو بصمات أصابع تتداخل مع القراءات).
يمكن بناء منحنى قياسي من خلال رسم المعدل النسبي لامتصاص (٪) المكتسب من كل معيار مرجعية مقابل تركيزه في ng / mL على منحنى لوغاريتمي.
الامتصاص النسبي (%) =مستوى الصفر لامتصاصأو عينة × 100
استخدم متوسط قيم امتصاص النسبية لكل عينة لتحديد التركيز المقابل للدواء المختبر في نغمات / مل من المنحنى القياسي.
الرسم التالي هو منحنى نموذجي للكلورامفينيكول.
فيديو
|
|
| الـ MOQ: | 5 مجموعات |
| السعر: | قابل للتفاوض |
| العبوة القياسية: | لون التعبئة |
| فترة التسليم: | 5-7 أيام |
| طريقة الدفع: | T/T |
| القدرة على التوريد: | 100 طقم شهريا |
ريجينTMمجموعة اختبار ELISA للكاناميسين هي اختبار المناعة الإنزيمية التنافسية لتحليل الكمية للكاناميسين في اللحوم / الكبد / الكلى ، الليزات الخلوية ، البول ، المصل والحليب.
أساليب استخراج عالية الاسترداد (> 80٪) وسريعة (10-40 دقيقة) وفعالة من حيث التكلفة.
حد الكشف هو 0.2 نانغ/غ.
قابلية إعادة إنتاج عالية
اختبار ELISA سريع (أقل من ساعة واحدة بغض النظر عن عدد العينات).
تستند هذه الطريقة إلى اختبار ELISA اللونية التنافسية. تم تغطية كاناميسين- BSA في آبار الصفائح. خلال التحليل، يتم تحديد نوع الكاناميسين- BSA.يتم إضافة العينة والجسم المضاد للكاناميسين (الجسم المضاد # 1) والجسم المضاد المرتبط بـ HRP (الجسم المضاد المرتبط بـ HRP # 2) إلى الآبار للفحصإذا كانت بقايا الكاناميسين موجودة في العينة، فإنها سوف تتنافس مع الكاناميسين على آبار الصفيحة للكاناميسين الأجسام المضادة،يستهدف الأجسام المضادة الرئيسية التي هي معقدة للدواء المغطاة على آبار الصفيحةإن شدة اللون الناتجة ، بعد إضافة رصيف HRP (TMB) ، لها علاقة عكسية مع تركيز بقايا كاناميسين في العينة.
ريجينTMمجموعة اختبار الكاناميسين ELISA لديها القدرة على تحديد 96 أو اختبار 42 عينة في نسخة مزدوجة (بافتراض 12 بئر للمعايير).أعد أي حفرة مجهرية غير مستخدمة إلى كيس الورق المقوى وإغلقها مرة أخرى بالمجفف المقدم في العبوة الأصلية* تخزين المجموعة عند 2- 8 درجات مئوية * مدة صلاحية المجموعة هي 12 شهراً عندما يتم تخزين المجموعة بشكل صحيح.
| محتويات الحزمة | المبلغ | التخزين |
| صفيحة مغلفة بالكاناميسين | 1 × 96 حفرة صفيحة | 2-8 درجة مئوية |
|
معايير الكاناميسين التحكم السلبي (أنبوب CAP أبيض) 0.2 ng/mL (أنبوب CAP الأصفر) 0.6 ng/mL (أنبوب CAP البرتقالي) 1.8 ng/mL (أنبوب الغطاء الوردي) 5.4 ng/mL ((أنبوب الغطاء الأرجواني 16.2 نانغ/ميلتر (أنبوب غطاء أزرق) 1000 نانغ/ميلتر ((تعزيز، اختياري، أنبوب القفص الأحمر) |
1 مل 1 مل 1 مل 1 مل 1 مل 1 مل 1 مل |
2-8 درجة مئوية
|
| كاناميسين Ab#1 | 6.0 مل | 2-8 درجة مئوية |
| Ab#2 المرتبطة بـ HRP | 6.0 مل | |
| 10×مواد تخفيف العينة | 15 مل | |
| 20 × محلول الغسيل | 28 مل | |
| أوقف المكافئ | 12 مل | |
| TMB Substrate (الجزء الرئيسي) | 12 مل | |
| 10 × عينة إضافية عازلة (اختياري) | 15 مل | |
| عينة عازلة رصيد | 2 مل |
إذا كنت لا تخطط لاستخدام المجموعة لأكثر من شهر واحد، احتفظ بـ Kanamycin Standard Stock، و Kanamycin Antibody #1 و HRP- Conjugated Antibody #2 في درجة حرارة -20 درجة مئوية أو في الثلاجة.
| نوع العينة | حد الكشف(ng/g أو ppb) |
| الأسماك/الروبيانات/اللحوم/الكبد/الكلى | 8 |
| الليزات الخلوية | 2 |
| البول / المصل | 5 |
| الحليب | 2 |
| المحللات | التفاعل المتقاطع (%) |
| الكاناميسين | 100 |
| ستريبتوميسين | < 0.1 |
| ديهيدروستريبوتوميسين | < 0.1 |
| نيوميسين | < 0.1 |
قارئ لوحات (microtiter) (450 نانومتر)
خلاط الأنسجة (على سبيل المثال المثالي للأنسجة)
خلاط الدوران (مثل خلاط الدوران الجيني من VWR)
10أنابيب 20، 100 و 1000 لتر
أنبوب متعدد القنوات: 50 - 300 لتر (اختياري)
تأكد من تخزين العينات بشكل صحيح. بشكل عام، يجب تجميد العينات عند 2-4 درجة مئوية لمدة لا تزيد عن 1-2 أيام. تجميد العينات إلى -20 درجة مئوية على الأقل إذا كانت بحاجة إلى تخزينها لفترة أطول.يمكن إذابة العينات المجمدة في درجة حرارة الغرفة (20 25 ° C / 68 77 ° F) أو في الثلاجة قبل الاستخدام.
خذ 100 لتر من الليزات الخلوية، وأضف 900 لتر من 1 × العينة المخفف العازل، خلط جيدا.
الطرد المركزي لمدة 5 دقائق عند 4000 g
خذ 50 ليرة واحدة من المادة فوق المستوى لكل بئر للاختبار.
ملاحظة: عامل التخفيف: 10
إلى 1.0 غرام من العينة المتجانسة، إضافة 4.0 مل من 1 × العينة Ext.
قم بتدوير العينة لمدة دقيقة مع خلاط الدوران.
قم بتفريغ العينة لمدة 5 دقائق عند 4000 غرام.
نقل بعناية 200uL من الطبقة العليا إلى أنبوب جديد,إضافة 1.375mL من 1X مخفف العينة و 25uL من عينة الموازنة العازل ، الدوران لمدة 30 ثانية.
استخدم 50 لتر لكل بئر للفحص.
ملاحظة: عامل التخفيف: 40
خذ 50 يو ليتر من عينة البول أو المصل، وأضف 1.2 مل من مخفف 1X العينة، ومزج جيدا.
طرد المركزي لمدة 5 دقائق عند 4000 غرام
خذ 50 لتر من السوبرنيتانت لكل بئر للاختبار.
ملاحظة: عامل التخفيف: 25
ملاحظة: عامل التخفيف:10
مهم: يجب أن يتم رفع جميع المفاعلات إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام (1 2 ساعات في20 25°C / 68 ¢ 77°تأكد من قراءة قسم " التحذيرات والاحتياطات "الصفحة3.يجب تحضير محلولات قبل اختبار ELISA مباشرة. يجب خلط جميع المفاعلات عن طريق عكسها أو الدوران بلطف قبل الاستخدام. يجب تحضير أحجام مطلوبة لعدد الآبار التي يتم تشغيلها.لا تعيد المفاعلات إلى أنابيب أو زجاجات المخزون الأصليةيمكن استخدام خزانات إستخدام مرة واحدة عند التعامل مع المفاعلات لتقليل خطر التلوث ويوصى به.
خلط حجم واحد من محلول غسل 20X مع 19 حجم من الماء المقطر.
تسمية الشرائط الفردية التي سيتم استخدامها والفاعلات المشاركة على النحو التالي:
| مكون | الحجم لكل تفاعل | 24 ردود الفعل |
| الأجسام المضادة للكاناميسين #1 | 50 لتر | 1. 2 مل |
| HRP-Conjugated Ab #2 | 50 لتر | 1. 2 مل |
| 1X محلول الغسيل | 1.0 مل | 24 مل |
| أوقف المكافئ | 100 ليرة | 2.4 مل |
| TMB Substrate (الجزء الرئيسي) | 100 ليرة | 2.4 مل |
إضافة 50 ليرة واحدة من كل معيار كاناميسين في نسختين في آبار مختلفة (إضافة المعايير إلى لوحة فقط في الترتيب من تركيز منخفض إلى تركيز مرتفع).
إضافة 50 لتر من كل عينة في نسخة مزدوجة إلى آبار عينة مختلفة.
إضافة 50 لتر من HRP-Conjugated Ab # 2 إلى كل بئر و 50 لتر من Kanamycin Antibody # 1 إلى كل بئر. خلط جيدًا عن طريق هز الصحن بلطف يدويًا لمدة 30 دقيقة.
قم بحفر الصفيحة لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (20 25 °C / 68 77 °F).تجنب الأشعة الشمسية المباشرة وأعلى المقاعد الباردة أثناء الحضانة. يوصى بتغطية لوحة الميكروتيتير أثناء الحضانة).
اغسل اللوحة 4 مرات بـ 250 ليرة واحدة من محلول الغسيل. بعد الغسل الأخير، قم بعكس اللوحة وانقر بلوحة جافة على مناشف ورقية برفق (أداء الخطوة التالية مباشرة بعد غسل الأطباق.لا تدع الصفيحة لتجف في الهواء بين خطوات العمل).
إضافة 100 لتر من الركيزة TMB. وقت التفاعل مباشرة بعد إضافة الركيزة. خلط المحلول عن طريق هز اللوحة برفق لمدة 30s أثناء الحضانة (((لا تعيد أي من الأساسيات إلى الحاوية الأصلية لتجنب أي تلوث محتمل. أي محلول أساسي يظهر تلوينًا يشير إلى التدهور ويجب التخلص منه.يوصى بتغطية لوحة الميكروتيتير أثناء الحضانة).
بعد الحضانة لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة (20 25°C / 68 ¢ 77°Fإضافة 100 ليرة واحدة من بوفر التوقف لإيقاف تفاعل الإنزيم.
قراءة اللوحة في أقرب وقت ممكن بعد إضافة Stop Buffer على قارئ اللوحة مع طول موجة 450 نانومتر (قبل القراءة ،استخدم مسحات خالية من القشرة على قاع اللوحة لضمان عدم وجود رطوبة أو بصمات أصابع تتداخل مع القراءات).
يمكن بناء منحنى قياسي من خلال رسم المعدل النسبي لامتصاص (٪) المكتسب من كل معيار مرجعية مقابل تركيزه في ng / mL على منحنى لوغاريتمي.
الامتصاص النسبي (%) =مستوى الصفر لامتصاصأو عينة × 100
استخدم متوسط قيم امتصاص النسبية لكل عينة لتحديد التركيز المقابل للدواء المختبر في نغمات / مل من المنحنى القياسي.
الرسم التالي هو منحنى نموذجي للكلورامفينيكول.
